原代細胞與細胞系有什么區(qū)別?

原代細胞與細胞系有什么區(qū)別?

　　依據(jù)傳統(tǒng)定義，自組織第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞直接從組織別離，生命周期有限，經(jīng)數(shù)次傳代后會逐步中止生長。原代細胞在有限的生命周期內(nèi)需控制好細胞的最大生長空間，以堅持細胞群中基因型和表型的分歧性。

　　細胞系是不時生長、分化的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。

　　倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?

　　倍增是培育物中細胞總數(shù)的翻倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培育瓶中移出，傳代培育過程的次數(shù)，傳代培育的目的，是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。

　　接納到的凍存細胞該如何處置?

　　收到包裝箱后，立刻將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快，以防止升溫。不要將細胞貯存在-80℃，這樣會對細胞形成不可挽回的傷害。

　　凍存的細胞該如何開端培育?

　　(1) 將一管細胞從液氮罐中取出，留意維護手和眼睛。

　　(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中，悄悄握住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體完整消融。

　　(3) 將凍存管立刻從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

　　(4) 用70%的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。

　　(5) 翻開蓋子，留意手指不要碰到里面的螺紋(留意，由于凍存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正?，F(xiàn)象)。

　　(6) 用多聚賴氨酸(或參照闡明書)包被培育瓶。多數(shù)細胞引薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。

　　(7) 蓋好培育瓶的蓋子，悄悄搖擺培育瓶以使細胞散布平均。若需求氣體交流可翻開蓋子。

　　(8) 將培育瓶放入培育箱中(37℃，5%CO2，95%空氣)

　　(9) 放入培育箱后第6-16小時改換一次培育基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。

　　細胞培育過程中，多久改換一次培育基?

　　這取決于細胞生長的速度。普通而言2-3天改換一次培育基，許多細胞培育實驗室通常在周一，周三，周五改換培育基。

　　留意：凍存細胞復(fù)蘇后，在6-16小時內(nèi)改換培育基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細胞。

　　能夠擴增培育和再次凍存原代正常人類細胞嗎?

　　這取決于細胞的類型。一些細胞類型像神經(jīng)細胞，神經(jīng)膠質(zhì)細胞和一些生長遲緩的上皮細胞，不引薦擴增培育和再次凍存。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞等等，能夠擴增培育和再次凍存。

　　但是，需求留意的是再次凍存的過程可能招致細胞生長性能的改動。

　　培育瓶中應(yīng)該參加幾體積的培育基?

　　我們引薦的用量為：T-25培育瓶5ml，T-75培育瓶15ml，T-150培育瓶30ml。